Exosome临床样本研究实验设计和正常对照
	Summay：Exosome 临床样本取样正确与否直接关系到下游实验检测。很多因素会影响样本质量，需要格外注意。
	Study design and normative controls
	三种实验分别需要不同水平的对照和流程。需要根据研究的问题设定流程。
	a.科研类实验需要研究Exosome的数量，大小，exRNA cargo，蛋白质组，脂质组学，代谢组学，糖原组学和其他的体液特征。尤其在筛选exosome的亚群的分子标记，或者通过大小结构电荷分离，需要注意实验应具有重复性。比如应减少血小板和中性白细胞来源的exosome。
	b.诊断类实验是需要研究疾病进程与biormarker特异性和数量相关性特征。为了验证特异性和检测Marker的相关性，在exosome分离时必须要检测特定的临床病理体液样本。与目前的诊断手段相比，这类研究，能够提高检验敏感性，减少费用或降低发病率。
	c.制备类实验是为病人制备exosome的研究。这需要最高水平的标准，即需要保留exosome的功能，还需要纯化的exosome。
	Normative controls
	对照组应该与病人（性别，年龄等相符），另外还有很多因素都与exosome的分泌有关，包括年龄、性别、种族、体重系数 (body mass index，BMI) 和用药（比如口服避孕药）。另外，女性还需要考虑怀孕与否，是否多胎妊娠等。空腹和餐后状态影响血浆脂蛋白和exosome的水平。另外，患病如感冒也应该考虑，因为急性感染会影响circulating cells 和 RNA。样本采集前是否进行体育锻炼，是否进行过肝素治疗应该考虑，因为会影响下游PCR反应，影响exosome与受体细胞的结合。
	Q:同一样本的进行多次重复检测是否可以用来做计算样本间差异（individual differences）？ A:不可以。同一样本取样后分装，可以用来验证exosome的分离效果，RNA提取和后续检测的操作差异性；或者从同一样本多个时间点取样可以用来检测特定exosome marker的时间差异性。但是还有一种情况就是，同一癌症病人手术前样本，和手术后的样本是可以配对的，或者感染前和感染后的同一样本，可以配对比较。
	总结：样本收集和处理需要注意事项  （A proposed checklist for sample collection and processing）
	l 年龄Age l 性别Sex l 种族Race/ethnicity l 女性：怀孕、妊娠、排卵周期、绝经期。Females: any current pregnancy, gravidity, ovulatory cycle and menopause state l 住院（目前）Hospitalization (recent) l 抗凝治疗Prior or current anticoagulant treatment or coagulo-pathy 肝素治疗Heparin therapy 肝素类似物Heparinoids 阿司匹林Aspirin 外周静脉凝血疾病，肺（肺栓塞）Known clotting disorder of peripheral veins, lung(pulmonary embolus) l 目前用药清单Current medication list (Including but not limited to birth control) l 抽烟？Smoker? l 滥用药物？Drugs of abuse? l 每周运动情况Physical activity-each week 每天工作或家庭活动    Daily job or home activities 坚持体育锻炼<每周3h  Dedicated physical activity <3 h per week 坚持体育锻炼>每周3h  Physical activity>3 h per week   l 睡眠情况Sleep pattern (e.g. night shift worker/sleep distur-bances) l 最后的饮食、饮水情况Last food and fluid intake              其他饮食因素Additional dietary details if possible